专利示意图
一、技术领域
生物医学领域
二、专利介绍
1.专利信息
专利类型：发明
专利权人：清华大学深圳国际研究生院
申请号：202310297747.7
发明人：黄鹏、维杰·潘迪、黄晶、林可、罗贝·彼特、张熙、陈淑
2.专利说明书摘要
本发明公开了一种多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒及其应用，所述质粒以pCW-puro为骨架载体，以EcoRI和BamHI为剪接位点将编码TFF3蛋白的核苷酸序列插入其中。本发明基于tet-on系统的多西霉素浓度梯度依赖性TFF3诱导表达质粒为TFF3在肿瘤生物学中的剂量依赖性功能及分子机制研究提供细胞模型构建的必须工具，相较于双质粒tet-on系统，单质粒系统对构建操作的友好性；具有puromycin抗性基因作为真核筛选基因，对所构建的细胞模型进行大规模阳性克隆筛选具有友好性；在慢病毒转染的稳定性与puromycin的筛选压力的作用下更容易筛选出稳转的阳性克隆。
3.创新点
（1）本发明涉及生物医学、肿瘤生物学、细胞生物学、分子生物学等学科的科研领域，针对肿瘤生物学领域缺少定量研究TFF3对肿瘤细胞功能影响的细胞模型的缺口，综合分子生物学、细胞生物学领域的理论和技术，提出了构建用于构建定量研究TFF3对肿瘤细胞功能影响的细胞模型的分子生物学工具的发明方案；
（2）该发明方案完全基于理论成熟的tet-on技术，采用具有丰富实践案例的pCW-puro质粒作为骨架，以承载编码TFF3蛋白的DNA序列，能够有效的在肿瘤细胞内响应培养条件中多西霉素的含量而定量地诱导表达TFF3蛋白；
（3）本发明定量精度、阳性克隆模型构建的稳定性，阳性克隆筛选的规模容量高于已有同类方法，是一种很有潜力的用于构建定量研究TFF3对肿瘤细胞功能影响的细胞模型的分子生物学工具。
4.痛点问题
（1）肿瘤生物学领域缺乏定量研究TFF3对肿瘤细胞功能影响的模型；
（2）潜在竞品通过荧光激发细胞筛选方法不够经济实惠，且不支持稳定转染的阳性克隆；
（3）潜在竞品不支持对细胞模型进行大规模阳性克隆的药筛。
5.技术优势
（1）单质粒系统对构建操作的友好性；
（2）具有puromycin抗性基因作为真核筛选基因，对大规模阳性克隆筛选具有友好性，相较于依赖荧光筛选阳性克隆的潜在竞品Tet-On advanced 与 pTRE-Dual2-TFF3），本发明降低了阳性克隆筛选难度和成本，拓宽了应用场景；
（3）在慢病毒转染的稳定性与puromycin的筛选压力的作用下更容易筛选出稳转的阳性克隆。
三、产业化信息
1.应用场景
用于肿瘤生物学领域中构建定量研究TFF3对肿瘤细胞功能和分子机制影响的细胞模型。
2.商业价值
此项技术拥有可以预估的商业前景，对于生物医药科研行业有以下市场价值：
本发明为定量研究TFF3对肿瘤细胞功能和分子机制提供了必不可少的分子生物学工具，对以TFF3作为靶点研究靶向药物，或者以TFF3作为疾病预后标记物开发诊断或预测试剂等相关方向的企业或者团体具有难以替代的选择性。
3.发展规划
（1）在多种癌症的多个细胞系中进一步验证该质粒的表达效果，以在疾病模型的层面拓宽该质粒的应用范围；
（2）在多种癌症的多个细胞系中进一步发展更全面的TFF3在肿瘤生物学中的剂量依赖性功能及分子机制研究的应用场景；
（3）该发明未来可应用至以TFF3为靶点的研究课题和商业项目上，快速提高我国在以TFF3为靶点的肿瘤诊断和治疗领域的水平；
（4）该技术通过推广试剂盒及测试耗材、水质检测相关技术服务及工程咨询等方式均可能占据市场。
4.合作方式
面议
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